墨兰又名报岁兰,为国兰四大品系之一。它色、香、姿、韵俱佳,花期一般从冬季至早春,盛花期为1～3个月。墨兰利用传统的分株繁殖方式,繁殖系数较低,利用组织培养进行快繁,可以在短时间内生产大量试管苗,满足市场需要。
1.选取外植体
选取墨兰6～13厘米的新芽,从植株茎部切离,除去叶片,充分洗净后将材料再切取2～3厘米,在10%次氯酸钠溶液中消毒10分钟,灭菌后用无菌水冲洗数次,再放到灭菌滤纸上吸干水分。然后在解剖镜下无菌操作剥取茎尖和腋芽,一般茎尖为2毫米,带2个叶原基,接种到培养基中。
2.类原球茎的诱导与增殖外殖体接种在white+1毫克/升6苄基腺嘌呤+5毫克/升萘乙酸+8.5%椰乳后,放置在23～25℃的黑暗条件下,培养1～2个月后可分化出1至数个乳白色的类原球茎。类原球茎的增殖应在转绿前,将其切割成小块,转入white+2毫克/升萘乙酸+5%椰乳+0.2%活性炭的培养基中。或放在液体培养基中。在旋转培养床上进行旋转培养,在其小块组织稍为长大后,转接到分化培养基上,分化芽和根。
3.芽的诱导与增殖
将开始萌发的类原球茎置于ms+3毫克/升6苄基腺嘌呤+1毫克/升萘乙酸培养基中,诱导芽的发生。培养30天后,即可看见丛生状的绿色类原球茎顶端冒出一个个尖细的小芽。当类原球茎发育成丛生状不定芽时,大多不能正常发育成茎。由类原球独立茎萌发的芽能继续发育,最终成为带叶的茎。将诱导出的芽进行分割,并接种在ms+4毫克/升6苄基腺嘌呤+1毫克/升萘乙酸培养基进行继代培养。培养温度为24～26℃,每天光照8～10小时。
4.根的诱导
当组培苗长出3片叶子,高2～3厘米时,将其转入1/2ms+3.0毫克/升萘乙酸培养基中诱导生根。
5.移植
兰花试管苗“自立”能力较差,移栽养护难度较大。如果不能解决这些问题,移栽中将会使组培苗损失严重,成苗率较低。因此,应尽量协调移栽过程中温度、光照、湿度、营养、移栽介质等因素与组培苗的关系,使兰花苗逐渐从异养向自养过渡。具体做法是:待组培苗长到10～12厘米高时,打开培养瓶盖,炼苗3～4天。然后将苗从瓶中取出,洗净粘在根上的培养基,注意尽量不要伤根,晾干后栽植在通气、透水、保湿的栽培介质中,先在高湿弱光条件下缓苗6～10天,以后放在15～25℃,空气相对湿度为80%左右的条件下养护,定期补施营养液并喷多菌灵,以防止杂菌感染。
