灵芝菌种扩制母种转管方法

发布日期:2021-03-31 15:49

灵芝母种转管技术

分离、保藏的母种数量少,需扩大繁殖成再生母种才能满足原种制作的需求。母种是菌种生产之本,必须纯度高,生活力强。凡保藏时间长和衰老的母种,需复壮后方可应用。在无菌条件下,把斜面菌丝移植到空白斜面上的方法称为转管。其程序是:

1.选取新鲜灵芝斜面菌种1支,在酒精灯火焰旁将棉塞顺时针转松并稍往外移动,而后右手小指和无名指基部夹紧棉塞取下,同时拿起接种刀垂直火焰上烧红并慢慢倾斜灼烧至接种时可能伸入试管内的刀柄部分,反复灼烧数次,伸人试管内贴在管壁上冷却,从斜面底部往前纵切1~2刀,以切破菌苔为度。取出接种刀放在接种工具架上,换取接种锄,跟上述一样灼烧处理,将斜面菌种自底部往前横切若干刀,整个斜面菌种被分割成许多方形小块,也可用接种钩纵横划成小菌块,塞上原棉塞并把切割的斜面菌种放在左手掌心和食指之间。取空白斜面1支,放在左手中指与无名指之间与斜面菌种试管紧靠,管口对齐,并旋松棉塞。

2.手拿接种铲或接种刀,如上述方法灼烧灭菌。以下操作均需使试管口靠近火焰,并略向下倾斜。

3.用右手无名指与小指基部夹住菌种试管的棉塞,小指基部与手掌夹住空白斜面棉塞,轻轻拔下。

4.将灼烧后的接种刀伸入空白斜面内贴住管壁前后移动冷却,然后取出伸入菌种试管内,挑取1小块稍带琼脂的菌苔,慢慢抽出并迅速伸入空白斜面试管内,将菌块安放在斜面中央。

5.灼烧试管口,并在火焰旁将棉塞塞上接种后的斜面试管上。

6.将刀部灼烧灭菌后放回架上,腾出手将塞塞紧放在一旁。然后重新取空白斜面放在左手菌种试管旁,如前接第二支斜面。如此,直至全部斜面接完。每支斜面一般转管30支以上空白斜面。

接后在试管上方贴上标签,注明名称、菌号、日期,放入28度恒温箱内培养。