蕉园经翻犁风化后，按株行距开定植穴。山地蕉园的定植穴适当加深加大，宽、深各约1米，施足腐熟基肥，与表土充分混合。平地蕉园也要开好定植穴，宽、深各约0.5米。水位较高的平地蕉园，可整成略高出地表的蕉畦或小土墩，然后开穴定植。
种植的深度，以比吸芽种苗原来的深度稍深1~2厘米为宜。种植过深对生长有抑制作用。山地比平地稍深些，秋植比春植略深些。定植过浅，易露球茎，不利于蕉株的生长。定植后覆盖细土，用脚踩压实，然后浇足定根水。秋植或旱季种植，宜在蕉头喷施新高脂膜并于附近盖草，减少水分蒸发。提高成活率。
香蕉试管苗的定植（营养杯苗），开坑（植穴）要与施入基肥同时进行，植穴宽60厘米×长60厘米×深40厘米，基肥以腐熟土杂肥为主，每株约20~25千克，每亩加入过磷酸钾50千克，硫酸钾25~30千克，要与土杂肥拌匀堆沤半个月，以上才能使用，香蕉试管苗定植宜在晴天，由于苗很幼嫩，最好先在施足基肥的穴中中盖一层薄瘦土，因为试管苗初期不能承受过重肥量。然后把苗放入穴中，小心用刀割破营养杯塑料袋（应尽量避免伤根），用碎土填平后稍压实，埋土不宜这深，约8~10厘米左右，在假茎的基部与长根之间，以不露宜，最后淋足定根水，以后应定期浇水或叶面喷水，保持土壤湿润，直到长出两片新叶。浇水是重要一关，应在保持土壤湿润的同时，以勿过量为好，否则易烂根死苗。如天气干旱，太阳强烈，最好用树叶等物遮阴，或用稻草覆盖坑面。
此外，蕉苗按种苗大小分级种植，丛植的每丛须先大小较一致的种苗，以防定植树后长得参差不齐，强苗抑制弱苗。吸芽苗种植时种苗的伤口，蕉鼻要同一方向，方便管理。
